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細(xì)胞周期同位素標(biāo)記法測(cè)定原理
標(biāo)記有絲分裂百分率法 (PLM) 是一種常用的測(cè)定細(xì)胞周期時(shí)間的方法。其原理是對(duì)測(cè)定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞,通過統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來測(cè)定細(xì)胞周期。
測(cè)定原理:
① 待測(cè)細(xì)胞經(jīng) 3H- 胸腺嘧啶核苷標(biāo)記后,所有 S 期細(xì)胞均被標(biāo)記。
② S 期細(xì)胞經(jīng) G2 期才進(jìn)入 M 期,所以一段時(shí)間內(nèi) PLM = 0。
③ 開始出現(xiàn)標(biāo)記 M 期細(xì)胞時(shí),表示處于 S 期zui后階段的細(xì)胞,已渡過 G2 期,所以從 PLM = 0 到出現(xiàn) PLM 的時(shí)間間隔為 G2期的持續(xù)時(shí)間。
④ S 期細(xì)胞逐漸進(jìn)入 M 期,PLM 上升,到達(dá)到zui高點(diǎn)的時(shí)候說明來自處于 S zui后階段的細(xì)胞,已完成 M,進(jìn)入 G1 期。所以從開始出現(xiàn) M 到 PLM 達(dá)到zui高點(diǎn) (≈ 100%) 的時(shí)間間隔就是 M 期的持續(xù)時(shí)間。
⑤ 當(dāng) PLM 開始下降時(shí),表明處于 S 期zui初階段的細(xì)胞也已進(jìn)入 M 期,所以出現(xiàn) LM 到 PLM 又開始下降的一段時(shí)間等于 S 期的持續(xù)時(shí)間。