細胞培養(yǎng)技術是生物醫(yī)學研究中一個基礎且關鍵的技術，廣泛應用于細胞生物學、藥理學、遺傳學、癌癥研究等領域。一個全 面的細胞培養(yǎng)技術總結應該包含以下幾個方面：

1. 培養(yǎng)環(huán)境

溫度：大部分哺乳動物細胞在37°C下培養(yǎng)zui為理想。

濕度：高濕度環(huán)境有助于防止培養(yǎng)基過早蒸發(fā)，通常在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)維持相對濕度在95%以上。

氣體組成：5% CO?是常用的培養(yǎng)箱氣體環(huán)境，有助于維持培養(yǎng)基pH的穩(wěn)定。

2. 培養(yǎng)基和營養(yǎng)物質(zhì)

培養(yǎng)基類型：液體培養(yǎng)基通常包含必需的氨基酸、糖類、維生素、無機鹽、緩沖系統(tǒng)等，不同類型的細胞可能需要特定的培養(yǎng)基。

添加劑：如血清（通常是胎牛血清）、生長因子、激 素、抗生 素等，以支持細胞生長和減少微生物污染。

3. 細胞種類和特性

原代細胞和細胞系：原代細胞直接從組織中分離出來，而細胞系則是通過不斷傳代獲得，可以無限增殖。

貼壁細胞與懸浮細胞：貼壁細胞需要附著在培養(yǎng)容器的表面生長，而懸浮細胞則可以在培養(yǎng)基中自由生長。

4. 培養(yǎng)容器和設備

培養(yǎng)容器：包括組織培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、細胞工廠等，根據(jù)細胞種類和實驗規(guī)模選擇。

重要設備：細胞培養(yǎng)箱（提供適宜的溫度、濕度和CO?環(huán)境）、生物安 全柜（無菌操作）、離心機、顯微鏡等。

5. 無菌技術

保持操作環(huán)境無菌是成功細胞培養(yǎng)的關鍵，包括使用無菌操作技巧、定期消 毒實驗室設備和表面等。

6. 傳代和亞克隆技術

傳代：定期移除老化的細胞，并將健康的細胞轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中繼續(xù)生長。

亞克?。簭漠愘|(zhì)性細胞群體中選擇單一細胞，用以建立具有一致性的細胞系。

7. 凍存和復蘇

細胞可以在低溫下長期保存（通常是液氮溫度，-196°C），需要特定的凍存培養(yǎng)基和程序來保護細胞。

8. 質(zhì)量控制

污染檢測：定期檢查細胞培養(yǎng)的微生物污染，包括細 菌、真 菌和支原體。

細胞驗證：確認細胞的身份和特性，避免交叉污染。