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細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常腎組織。
2)細胞鑒定:Ⅷ因子相關抗原(Factor Ⅷ)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:圓形,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 |
Rat glomerular endothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1589 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞介紹:
腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團毛細血叢。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用的進行。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層:內(nèi)層、中層和外層。其中,內(nèi)層為內(nèi)皮細胞層,附著在腎小球基底膜內(nèi)。
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質, 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質很充足, 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人原代食道上皮細胞 |
SW1463直腸癌 |
AOC1 Antibody Blocking Peptide |
MC-38/RFP小鼠結腸癌帶紅色熒光 |
HEC-1-Azi宮癌 |
Phospho-A Raf (Tyr301/302) Antibody Blocking Peptide |
G422/GFP小鼠腦神經(jīng)膠質母細胞 |
NP69-SV40T永生化人鼻咽上皮細胞 |
PADI6 Antibody Blocking Peptide |
MouseS小鼠皮膚成纖維細胞 |
GP2-293Luc人胚腎上皮包裝細胞 |
FBXO42 Antibody Blocking Peptide |
NSC34不能出售小鼠神經(jīng)元細胞 |
TU 686喉癌細胞 |
ASTE1 Antibody Blocking Peptide |
Alpha TC1 clone6小鼠胰島素瘤胰島a細胞 |
4T1/GFP4T1/GFP 小鼠乳腺癌細胞帶綠色熒光 |
Recombinant human TNF-Alpha protein, GST |
MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞 |
SUNE-1亞株6-10B |
ARID3A Antibody Blocking Peptide |
NCI-H1618小細胞肺癌 |
兔原代卵巢間質細胞 |
KLHL7 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H69小細胞肺癌 |
人原代卵巢間質細胞 |
NCF4 Antibody Blocking Peptide |
Hs 766.T胰腺癌 |
大鼠原代海馬神經(jīng)元細胞 |
TGFBR3 Antibody Blocking Peptide |
CFPAC-1胰腺導管腺癌 |
綿羊原代卵巢顆粒細胞 |
CHST6 Antibody Blocking Peptide |
B16-F10-Luc-GFP熒光素酶/GFP標記的小鼠皮膚黑色素瘤細胞 |
小鼠原代zi宮內(nèi)膜上皮細胞 |
HMGB1 Antibody Blocking Peptide |
DU145-Luc熒光素酶標記的人前列腺癌細胞 |
大鼠原代脾源性內(nèi)皮祖細胞 |
ANXA2R Antibody Blocking Peptide |
RM-1-Luc熒光素酶標記的小鼠前列腺癌細胞 |
大鼠原代卵泡膜細胞 |
ZCCHC4 Antibody Blocking Peptide |
NHEK正常人表皮角質形成細胞 |
豬原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 |
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞C1orf87 Antibody Blocking Peptide |