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產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
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產(chǎn)品名稱 |
人食管上皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary human esophageal epithelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1283 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層 :黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。其中上皮細(xì)胞主要在黏膜層，其上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護(hù)作用。在發(fā)育過程中，食管的上皮細(xì)胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。
1) 細(xì)胞來源于人正常食管組織。
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
食管損傷、從而導(dǎo)致食管長期的慢性炎癥、潰瘍，或慢性刺激，進(jìn)而食管上皮增生，后導(dǎo)致癌變。實驗證明，彌漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病變。在食管癌的發(fā)生中，上皮 -間質(zhì)轉(zhuǎn)化( EMT)是上皮細(xì)胞來源的惡性腫瘤細(xì)胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學(xué)過程，有利于腫瘤轉(zhuǎn)移。
2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）免yi熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5) 細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒炈杳芏?，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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ME-180 (STR)人zi宮頸表皮癌細(xì)胞 |
大鼠原代小腸平滑肌細(xì)胞 |
FAST kinase Antibody Blocking Peptide |
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人原代膽囊成纖維細(xì)胞 |
小鼠原代DRG神經(jīng)元細(xì)胞 |
SLC22A11 Antibody Blocking Peptide |
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羊原代肺成纖維細(xì)胞 |
大鼠原代腎足細(xì)胞 |
ASGR1 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
大鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞 |
SCAMP4 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 |
羊原代主動脈平滑肌細(xì)胞 |
Recombinant MPXV E8L protein, C-His (HEK293) |
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牛原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
Matrilin 1 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 |
大鼠原代甲狀腺上皮細(xì)胞 |
TOR3A Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代B淋ba細(xì)胞 |
大鼠原代纖維環(huán)細(xì)胞 |
NUP214 Antibody Blocking Peptide |
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人原代晶狀體上皮細(xì)胞 |
人原代骨骼肌細(xì)胞 |
Phospho-FoxO1 (Ser319) Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
豬原代乳腺成纖維細(xì)胞 |
EXOC3 Antibody Blocking Peptide |
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人原代頸靜脈球瘤細(xì)胞 |
兔原代少突膠質(zhì)細(xì)胞 |
ELAVL3 Antibody Blocking Peptide |
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人原代食管成纖維細(xì)胞 |
人原代直腸平滑肌細(xì)胞 |
SMCR8 Antibody Blocking Peptide |
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兔原代肝成纖維細(xì)胞 |
小鼠原代腎足細(xì)胞 |
GPCR LOC51210 Antibody Blocking Peptide |
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人原代鞏膜成纖維細(xì)胞 |
大鼠原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
DCAF13 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代胃cajal間質(zhì)細(xì)胞 |
兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 |
人食管上皮細(xì)胞OR51F1 Antibody Blocking Peptide |