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| 產(chǎn)品名稱 |
人II型肺泡上皮細胞 |
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英文名稱 |
Human primary type II alveolar epithelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1254 |
包裝規(guī)格：1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶 細胞介紹：
Ⅱ型肺泡細胞（ATⅡ）又稱顆粒肺泡細胞，散在分布于ATⅠ肺泡細胞（ATⅠ）之間及其相鄰的肺泡間隔結合處。其體積較小，呈立方形，表面稍突向肺泡腔。細胞核大而圓，胞質染色較淺淡，胞質中常見空泡。數(shù)量較ATⅠ多，ATⅡ占肺泡上皮細胞總數(shù)的14%到16%，但僅覆蓋5℅的肺泡表面。ATⅡ體積比ATⅠ小很多，人約為900um3 .在細胞游離面有較多的短微絨毛，尤其在細胞邊緣部更多。細胞表面有 MPA凝集素，對α-半乳糖殘基有特異性反應。相鄰細胞以緊密連接或中間連接相連，胞質內有較多的線粒體和粗面內質網(wǎng)，還有多泡體、溶酶體和板層體[1]。
ATⅡ是肺泡上皮細胞的“干細胞”，它的功能多樣：能增殖成新的ATⅡ，還可以分化為其他上細胞如ATⅠ；合成和分泌表面活性物質的功能；肺水轉運功能；強大的功能。這些功能與以下有密不可分的關系。
細胞特性：
1)細胞來源于人正常肺組織。2)細胞鑒定：肺表面活性蛋白 A（SP-A）或肺表面活性蛋白 C（SP-C）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于 90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用Delf原代上皮細胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。產(chǎn)品的運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質， 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低， 細胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質很充足， 也很難使細胞適應從體內的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大，會導致營養(yǎng)物質供應不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度， 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內在聯(lián)系被打破，分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說，盡快使接種的細胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細胞迅速黏附于底物，待細胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞，以利于進一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調整為（2～5）×105 cells／ml，或實驗所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進行傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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| 大鼠肝間質細胞 | TM3細胞 | Polycephalomyces nipponicus |
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| 大鼠腸間質細胞 | P388細胞 | PPRE X3-TK-luc |
| 大鼠胃黏膜成纖維細胞 | CFSCS-2G細胞 | pREDKI |
| 大鼠肝卵圓細胞 | NFS-60細胞 | pRL-TK |
| 大鼠腸微血管內皮細胞 | mouseHC11細胞 | pRS403 |
| 大鼠腸神經(jīng)膠質細胞 | minkMv.l.lu細胞 | pRS423 |
| 大鼠腹膜間皮細胞 | C2C12細胞 | pRS424 |
| 大鼠腸巨噬細胞 | L5178YTK+/-clone(3.7.2C)細胞 | pRS425 |
| 大鼠內括約肌平滑肌細胞 | YACS-1細胞 | pRS426 phagemid in E. coli |
| 大鼠腸道干細胞細胞 | EL4細胞 | pRSETA |
| 大鼠腸粘膜上皮細胞 | E.G7-OVA細胞 | pRSFDuet-1 |
| 小鼠腹腔巨噬細胞 | L1210細胞 | pRSV-Rev |
| 大鼠腎小管上皮細胞 | CTLL-2細胞 | Pseudozyma aphidis |
| 大鼠腎小球系膜細胞 | G422細胞 | PSH65 |
| 大鼠腎小球內皮細胞 | GTCQ-E1細胞 | pShuttle |
| 大鼠腎足細胞 | GT1.1 /GTCQ-E1細胞 | Psilocybe pseudobullacea |
| 大鼠輸尿管上皮細胞 | Bv-2細胞 | psPAX2 |
| 大鼠輸尿管平滑肌細胞 | bend.3細胞 | 人II型肺泡上皮細胞pTrc99a |