產(chǎn)品詳細 內(nèi)膜癌細胞
形態(tài)特性
生長特性
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
rabbitLeptin,LEPELISAKit 兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2-Amino-4-methylbenzothiazole  中文名：2-氨基-4-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S  度：98.0%

rabbitiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2-Acetyl-3-ethylpyrazine  中文名：2-乙?；?br> 膽戊基碳酸酯  Cholesterol Amyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

膽正辛基碳酸酯  Cholesterol n-Octyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠凋亡相關(guān)因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒 ，英文名： Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit

膽己基碳酸酯  Cholesterol Hexyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T

4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))  Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒 Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit

碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))  Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱Mouselymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit小鼠LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T

水楊酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC))  4-Octylphenyl Salicylate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 冰凍切片組織MAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC))  Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N))  4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(N) 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)ELISA試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit

4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))  4,4'-Diamyloxyazoxybenzene  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(N) 雞促黃體(LH)ELISA檢測試劑盒ChickenLeinizingHormone,LHELISAKit 96T/48T

4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯  4,4'-Dibutoxyazoxybenzene  質(zhì)量規(guī)格： 人Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)試劑盒 Human Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit
人血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:VCAM1, CD106, INCAM-100, vascular cell adhesion molecule 1 Human VCAM-1/CD106(Vascular Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組VCAM-1/CD106濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
ECC10細胞5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。