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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:NCI-H217細胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-0110272
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
NCI-H217細胞在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
詳情介紹:

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學研究

產(chǎn)品名稱

NCI-H217細胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0110272

產(chǎn)品詳細 肺鱗癌細胞;NCI-H217
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞1989年建系,源自一位患有肺鱗狀細胞癌的男性,該患者不吸煙。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代,每周2~3次。
實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個 
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺; 

培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
Rat vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒  (-)-Phaselic acid  中文名:  分子式:C13H12O8 

Rat thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒  14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyra
3-甲基菲(>98.0%(GC))  3-Methylphenanthrene  質量規(guī)格:>98.0%(GC) ELISAKitomein人網(wǎng)膜素規(guī)格:48T/96T

3--1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))  3-Bromo-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠多巴胺受體D1(DRD1)ELISA試劑盒 ,英文名: DRD1 ELISA Kit

5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))  5-Chloro-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(T) 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 96T/48T

2-氯-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))  2-Chloro-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 大鼠葡萄糖激酶(GK)試劑盒 Rat glucokinase,GK ELISA Kit

4,7-二甲基-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(T))  4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(T) 英文名稱RatHaptoglobinELISAKIT大鼠結合珠蛋白(Hpt)規(guī)格:96T/48T

5,6-二甲基-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))  5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(T) 酵母NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20(10樣本)

2,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))  2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>96.0%(HPLC) ELISAKitAOPP人晚期氧化蛋白產(chǎn)物規(guī)格:48T/96T

2,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))  2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒 ,英文名: D1R ELISA Kit

2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))  2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 大鼠糖皮質受體β(GR-β)ELISA檢測試劑盒Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit 96T/48T

3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))  3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 人白介素1α(IL-1α)試劑盒 Human IL-1α ELISA Kit
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:SERPINE1, PAI, PAI-1, PLANH1, Endothelial Plasminogen Activator Inhibitor Human PAI1(Plasminogen Activator Inhibitor 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PAI1濃度
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、NCI-H217細胞貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。


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