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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:HL-60細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-0109409
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
HL-60細(xì)胞在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
詳情介紹:

我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究

產(chǎn)品名稱

HL-60細(xì)胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0109409

產(chǎn)品詳細(xì) 原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60
形態(tài)特性 髓母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞由CollinsSJ從一位患有急性早幼粒細(xì)胞性白血病的36歲白人女性的外周血中分離建立;可自發(fā)分化,或在丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1%to1.5%)、放線菌素D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。該細(xì)胞具有吞噬活性和趨化反應(yīng),癌基因myc陽性,表達(dá)補(bǔ)體受體和FcR。
培養(yǎng)條件 RPMI1640+10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1×105~1×106/ml,每2~3天換液1次。
實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個 
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺; 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 

實驗要點(diǎn)及說明 :
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體elisa試劑盒   小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒、小鼠氧化低密度脂蛋白抗體elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個月。  N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide  42137-88-2  中文名:N,N-雙(2-氯乙基)對甲苯磺酰胺  分子式:C11H15C
肉堿 HPLC≥98% 20mg 0.2摩爾基質(zhì)金屬蛋白酶2/9抑制劑卡托普利(captopril)1毫升

Ophiopojaponin C HPLC≥98% 5mg MouseBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISA試劑盒小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Cyclocephaloside II HPLC≥98% 5mg 小鼠野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 ,英文名: AGRP ELISA Kit

Hydroxy Sprengerinin C,  HPLC≥98% 10mg 兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA檢測試劑盒rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 96T/48T

Tokinolide B HPLC≥98% 10mg 犬雌二醇(E2)試劑盒 Canine Esadiol,E2 ELISA Kit

Raddeanoside  HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseMMELISAKit人糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)規(guī)格:96T/48T

()薄荷酮 GC≥98% 20mg 大麥β-淀粉酶活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒20

(+)兒茶素 HPLC≥98% 20mg RatLDL-ICELISA試劑盒大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(+)松蘿酸鈉 HPLC≥98% 20mg 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒 ,英文名: KLH ELISA Kit

(R型)人參皂苷Rg HPLC≥98% 20mg 小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA檢測試劑盒MouseOrexinAELISAKit 96T/48T
手足口病腸道病毒(EV71)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒48Ethyl 2-(3-cyano-hydroxyphenyl)-methyl,3-thiazole-carboxylate1617982

手足口病科薩奇A16病毒(CoxA16)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒48Ethyl 2-(3-cyano-isobutoxyphenyl)-methyl-thiazolecarboxylate18445

手足口病EV71型/CoxA16型病毒雙重?zé)晒釶CR檢測試劑盒48Ethyl 2-(3-formyl-hydroxyphenyl)-methylthiazole-carboxylate1617981

手足口病EV-U/EV71型/CoxA16型病毒三重?zé)晒釶CR檢測試劑盒48Ethyl 2-(4-hydroxyphenyl)-methylthiazole-carboxylate1617979

諾如病毒G1/ G2分型雙重?zé)晒釶CR檢測試劑盒48Febuxostat143非布索坦
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、HL-60細(xì)胞貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。


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