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試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30
min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶11試劑盒
英文簡稱：詳見說明書
產(chǎn)品貨號：BH-0012237
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
小鼠鈣通道阻滯劑elisa試劑盒 小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒
規(guī)格型號：96T/48T 小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒、小鼠鈣通道阻滯劑eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Danshenxinkun A 65907-75-7
中文名：丹參新醌甲 分子式：C18H16O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 細胞毒活性; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒 Dasatinib
中文名：達沙替尼 分子式：C22H26ClN7O2S 度：98.0%
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISAKit Ethyl β-D-fructofuranoside
1820-84-4 中文名：乙基-β-D-果糖苷 分子式：C8H16O6 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠鈣結(jié)合蛋白elisa試劑盒 小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒
規(guī)格型號：96T/48T 小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠鈣結(jié)合蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Drospirenone
中文名：屈螺酮 分子式：C24H30O3
小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒 Dasatinib 中文名：達沙替尼
分子式：C22H26ClN7O2S
4-Oxododecanedioic acid 3
4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 122475-42-7
中文名： 分子式：C18H24N4O18 度：% 關(guān)鍵詞： 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒
4-Methylamino-3-nitrobenzoic
acid 41263-74-5 中文名：
分子式：C8H8N2O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒
4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic
acid 152628-03-0 中文名：
分子式：C12H14N2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit
4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile 675126-26-8
中文名： 分子式：C15H19N3O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠鐵蛋白(FE)ELISAKit
交聯(lián)葡聚糖凝膠G-50；交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-50
Sephadex
G-50
其他Cross-inked dextran gel
G-50
產(chǎn)品規(guī)格：國產(chǎn)
包裝：25克/100克
CAS號：9048-71-9
干顆粒直徑：40～120um
分子量分級范圍：A.肽及球形蛋白質(zhì)：1500～30000；B. 葡聚糖（線性分子）：500～10000
床體積毫升/克干分子篩：9～11ml/g
PH：2～13
性狀：珠?；蚍勰瑢儆H水性凝膠。性穩(wěn)定，不溶于水、弱酸和堿溶液，遇強酸能使糖苷鍵分解
用途：生化研究
基質(zhì)金屬蛋白酶11試劑盒檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。