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試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標(biāo)準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30
min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：CD30配體試劑盒
英文簡稱：詳見說明書
產(chǎn)品貨號：BH-0011698
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準品 150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準品
150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準品 150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準品 150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準品
150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
Thiamphenicol 中文名：甲砜霉素
分子式：C12H15Cl2NO5S 度：98.0% 豚鼠組胺(HIS)ELISAKit
Fenbendazole 中文名：芬苯達唑
分子式：C15H13N3O2S 度：98.0% 豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit
中文名：利多卡因
分子式：C14H22N2O 度：98.0% 豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISAKit
Mepivacaine 中文名：甲哌卡因
分子式：C15H22N2O 度：98.0% 豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISAKit
4-Acetamidophenol 中文名：對乙酰氨基酚
分子式：C8H9NO2 度：98.0% 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit
Tokinolide B
112966-16-2 中文名： 分子式：C24H28O4 組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性檢測試劑盒20次
Methyl
4-O-feruloylquinate 19
Trehalose 99-20-7
中文名：海藻糖 分子式：C12H22O11 兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chlorogenic
acid 327-97-9 中文名：綠原酸
分子式：C16H18O9 Human plasminogen activator inhibitor 1
(PAI-1) ELISA Kit 纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
Ethyl
rutinoside 187539-57-7 中文名：蕓香糖乙苷
分子式：C14H26O10 HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit
可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D-α-氨基-β-羥基丁酸；D-羥基丁氨酸；D-異赤絲藻氨基酸；D-2-氨基-3-羥基丁酸
D-Threonine
其他D-α-Amino-β-hydroxybutyric acid；D-2-Amino-3-hydroxybutanoic
acid；D-β-Hydroxy-2-aminobutyric
acid；(2R,3S)-2-Amino-3-hydroxybutyric
acid；(2R,3S)-(+)-Threonine
產(chǎn)品規(guī)格：BR,99%
包裝：5克/25克/100克/500克
CAS號：632-20-2
C4H9NO3=119.13
級別：BR
含量：≥99.0%
比旋光度：+27.0o～+29.0o
氯化物：≤0.10%
干燥失重：≤0.20%
灼燒殘渣：≤0.20%
重金屬：≤10ppm
砷鹽：≤2ppm
性狀：結(jié)晶體或結(jié)晶粉末。易溶于水，不溶于無水乙醇和。熔點251～253℃。半數(shù)致死量(大鼠，腹腔)5361mg/kg
CD30配體試劑盒用途：生化研究
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。