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下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：ATP6人ATP合酶6免費代測試劑盒
英文簡稱：Human ATP Synthase 6(ATP6)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH103503
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30
min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
全反式4-酮基視黃酸 all-trans 4-Keto Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatAbELISAKit大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)規(guī)格：96T/48T
5,8-環(huán)氧-13-順式視黃酸(非對映) 5,8-Epoxy-13-cis Retinoic Acid(Mixture of
Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatacetylcholineELISAKit大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
全反式5,8-環(huán)氧視黃酸 (非對映) all-trans 5,8-Epoxy Retinoic Acid (Mixture of
Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatacetylcholineELISAKit大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
去羥基比卡魯胺 Deshydroxy Bicalutamide 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatacetylcholinereceptoraibodyELISAKit大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)規(guī)格：96T/48T
去氟比卡魯胺 Desfluoro Bicalutamide 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatacetylcholinereceptoraibodyELISAKit大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)規(guī)格：96T/48T
(S)-比卡魯胺 (S)-Bicalutamide 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatACTHELISAKit大鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)規(guī)格：96T/48T
(R)-比卡魯胺 (R)-Bicalutamide 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatACTHELISAKit大鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)規(guī)格：96T/48T
白消安-d8 Busulfan-d8
質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatActininαELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(Actininα)規(guī)格：96T/48T
羥基脲-15N Hydroxyurea-15N 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatActininαELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(Actininα)規(guī)格：96T/48T
BW
B70C BW B70C 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatActi-vatedproteinCELISAKit大鼠活化蛋白C規(guī)格：96T/48T
PANC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽，N6-苯甲酰-鈉鹽Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphate,
N6-Benzoyl-, Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
Promocell
C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤;M5076P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸鹽，三鋰鹽P1,P5-Di(adenosine-5’-)pentaphosphate,
Trilithium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口
NRG1
Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5‘-O-(-2-硫代三1酸）三鋰鹽Adenosine 5′-O-(2-Thiodiphosphate),
Trilithium Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
MCF-7
[MCF7], 人癌細胞系2-甲基硫代二1酸腺苷2-Methylthio-ADP 3 salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
Uzarigenin
Odoroside
H 18810-25-8 中文名：
分子式：C30H46O8 組織PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Neridienone
B 61671-56-5 中文名：
分子式：C21H28O4
HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Neritaloside 465-13-4
中文名： 分子式：C32H48O10 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ophiopogonin
D 945619-74-9 中文名：麥冬皂苷D
分子式：C44H70O16 Human thymus activation regulated chemokine
(TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
ATP6人ATP合酶6免費代測試劑盒 （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。