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蛋白質(zhì)的鹽析實(shí)驗(yàn)原理
日期：2025-04-26 02:42
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摘要：蛋白質(zhì)的鹽析實(shí)驗(yàn)原理:
蛋白質(zhì)是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷)相互排斥作用維持蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定，向蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽可破壞這些穩(wěn)定因素，使蛋白質(zhì)沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質(zhì)沉淀經(jīng)透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質(zhì)能再次溶解并恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)和生物活性，稱為透析。由于蛋白質(zhì)分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內(nèi)，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質(zhì)透過，而蛋白質(zhì)不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質(zhì)混合的中性鹽及其他小分子物質(zhì)。蛋白質(zhì)鹽...
蛋白質(zhì)的鹽析實(shí)驗(yàn)原理:
蛋白質(zhì)是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷)相互排斥作用維持蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定，向蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽可破壞這些穩(wěn)定因素，使蛋白質(zhì)沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質(zhì)沉淀經(jīng)透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質(zhì)能再次溶解并恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)和生物活性，稱為透析。由于蛋白質(zhì)分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內(nèi)，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質(zhì)透過，而蛋白質(zhì)不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質(zhì)混合的中性鹽及其他小分子物質(zhì)。蛋白質(zhì)鹽析常用中性鹽，如硫酸銨、硫酸鈉、NaCl等。蛋白質(zhì)經(jīng)鹽析沉淀后，需脫鹽才能獲得純品。脫鹽常用的方法為透析法。由于蛋白質(zhì)分子量較大，不能透過半透膜，而無(wú)機(jī)鹽及其他低分子物質(zhì)可以透過，故利用透析法可將鹽析得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行純化。將蛋白質(zhì)溶液裝入透析袋內(nèi)，袋口用線扎緊，然后將其放進(jìn)蒸餾水中，蛋白質(zhì)分子量大，不能透過透析袋而被截留在袋內(nèi)，而小分子鹽由于透析袋內(nèi)外濃度差，可透過透析袋，通過不斷更換袋外蒸餾水，直至袋內(nèi)鹽分透析完為止。透析常需較長(zhǎng)時(shí)間，為保證蛋白質(zhì)不變性，透析宜在低溫下進(jìn)行。
蛋白質(zhì)是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷)相互排斥作用維持蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定，向蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽可破壞這些穩(wěn)定因素，使蛋白質(zhì)沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質(zhì)沉淀經(jīng)透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質(zhì)能再次溶解并恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)和生物活性，稱為透析。由于蛋白質(zhì)分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內(nèi)，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質(zhì)透過，而蛋白質(zhì)不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質(zhì)混合的中性鹽及其他小分子物質(zhì)。蛋白質(zhì)鹽析常用中性鹽，如硫酸銨、硫酸鈉、NaCl等。蛋白質(zhì)經(jīng)鹽析沉淀后，需脫鹽才能獲得純品。脫鹽常用的方法為透析法。由于蛋白質(zhì)分子量較大，不能透過半透膜，而無(wú)機(jī)鹽及其他低分子物質(zhì)可以透過，故利用透析法可將鹽析得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行純化。將蛋白質(zhì)溶液裝入透析袋內(nèi)，袋口用線扎緊，然后將其放進(jìn)蒸餾水中，蛋白質(zhì)分子量大，不能透過透析袋而被截留在袋內(nèi)，而小分子鹽由于透析袋內(nèi)外濃度差，可透過透析袋，通過不斷更換袋外蒸餾水，直至袋內(nèi)鹽分透析完為止。透析常需較長(zhǎng)時(shí)間，為保證蛋白質(zhì)不變性，透析宜在低溫下進(jìn)行。