熒光抗體技術(shù)的三個(gè)方法介紹：

1. 直接法

     直接法是熒光抗體技術(shù)簡(jiǎn)單、基本的方法。它通過(guò)標(biāo)記抗體直接與相應(yīng)抗原（待檢抗原標(biāo)本）結(jié)合，來(lái)鑒定未知抗原。

其優(yōu)點(diǎn)為：

①由于在反應(yīng)中只有兩種因子參與，結(jié)果判斷較簡(jiǎn)單；

②特異性強(qiáng)，與其他抗原交叉染色較少；

③操作步驟少，方法簡(jiǎn)便、省時(shí)。

其缺點(diǎn)有；

①敏感性較差；

②一種標(biāo)記抗體只能鑒定一種抗原；

③不能用于鑒定未知抗體。

2. 雙標(biāo)記法

雙標(biāo)記法是用兩種熒光素（常用FITC和PE）分別標(biāo)記特異性不同的抗體，用于檢測(cè)同一標(biāo)本中的不同抗原。此法常用于細(xì)胞表面抗原和受體的研究。

3. 間接法

間接法是目前常用的方法。首先用已知未標(biāo)記的抗體（第1抗體）與待檢抗原反應(yīng)或用未知抗體與已知抗原反應(yīng)，反應(yīng)一定時(shí)間后，洗去未結(jié)合的抗體，再與標(biāo)記的抗免 疫球蛋白抗體（二抗）反應(yīng)。在第1步反應(yīng)中，若抗原抗體發(fā)生了反應(yīng)，則抗體被固定在標(biāo)本上，那么第2步反應(yīng)中標(biāo)記的抗體（二抗）必然與第1步反應(yīng)形成的抗原抗體復(fù)合物中的抗體發(fā)生反應(yīng)，這樣就可以通過(guò)二抗的示蹤，對(duì)標(biāo)本中未知抗原或抗體進(jìn)行鑒定。

其優(yōu)點(diǎn)為；

①敏感性較高，是直接法的5-10倍；

②用一種標(biāo)記的抗體，就能與一種以上的相應(yīng)的抗體或抗原配合鑒定多種未知的抗原或抗體；

③既能鑒定未知抗原，又能鑒定未知抗體。

其缺點(diǎn)有

①在反應(yīng)中有多種因子參與，容易產(chǎn)生非特異性染色，結(jié)果判斷有時(shí)較困難；

②操作步驟多，費(fèi)時(shí)。