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雙特異性抗體的作用方法
雙特異性抗體可以靶向多個(gè)抗原或抗原表位,發(fā)揮的協(xié)同效應(yīng)比單克隆抗體具有更多優(yōu)勢(shì),同時(shí)還可介導(dǎo)多種特定生物學(xué)效應(yīng)的發(fā)生。比如:
①、橋聯(lián)免 疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞,通過招募和激活免 疫細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞;
②、抑制或激發(fā)多個(gè)信號(hào)通路,發(fā)揮協(xié)調(diào)效應(yīng);
③、借助抗體雙價(jià)結(jié)構(gòu),介導(dǎo)蛋白復(fù)合物形成,發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)等。
1.化學(xué)交聯(lián)法
化學(xué)交聯(lián)法的制備原理主要是通過特定的化學(xué)交聯(lián)劑的作用,使不同特異性的抗體分子或 F(ab')間形成二硫鍵,從而產(chǎn)生異源二聚體。在形式上可以是整個(gè)抗體分子間的偶聯(lián), 亦可是單價(jià)之間或F(ab')與F(ab')2間的偶聯(lián)。該方法制備的雙特異性抗體可直接利用現(xiàn)存的抗體且產(chǎn)率高,但可能因損害抗原結(jié)合位點(diǎn)而影響其活性。
2.雜交瘤結(jié)合法
該方法以傳統(tǒng)的單克隆抗體技術(shù)為基礎(chǔ),將分泌兩種抗體的雜交瘤細(xì)胞融合,使其能產(chǎn)生穩(wěn)定分泌雙特異性抗體的雜交瘤。各自的免 疫球蛋白(Ig)基因的共同表達(dá), 產(chǎn)生兩種H和L鏈, 組合形成具有親本Ig特性的雙特異性抗體。利用雜交瘤方法制備的雙特異性抗體隨機(jī)性較大,效率相對(duì)較低,但其生物活性較好,抗體結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定。
3.基因克隆法
基因工程技術(shù)為制備雙特異性抗體開辟了新途徑,可通過將編碼親本抗體的基因克隆出來轉(zhuǎn)染到寄主細(xì)胞中直接表達(dá)雙特異性抗體,也可通過基因剪切,構(gòu)建單鏈抗體(scFv),制備改良的雙特異性抗體。