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ELISA測定溫育設置
日期:2025-04-27 23:30
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摘要:
溫育這一步是ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘-1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1-2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的**可達頂峰。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在4...
溫育這一步是ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘-1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1-2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的**可達頂峰。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應4℃更為徹底,在放射免yi測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。