熒光定量PCR是通過檢測并記錄反應(yīng)體系中熒光信號(hào)的變化來實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程。熒光定量PCR的擴(kuò)增程序，以熒光染料法為例，擴(kuò)增程序可分為擴(kuò)增反應(yīng)階段和熔解反應(yīng)階段。擴(kuò)增反應(yīng)階段采用兩步法擴(kuò)增，每一次PCR循環(huán)結(jié)束都檢測并記錄熒光信號(hào)，由此得到一條擴(kuò)增曲線。

擴(kuò)增曲線是描述PCR動(dòng)態(tài)進(jìn)程的曲線，以循環(huán)數(shù)為橫坐標(biāo)，以反應(yīng)過程中實(shí)時(shí)熒光信號(hào)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)。

擴(kuò)增曲線可以分成四個(gè)時(shí)期：基線期，指數(shù)期，線性期，平臺(tái)期。

1、基線期：擴(kuò)增曲線的水平部分，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物**量的變化。

2、指數(shù)期：PCR指數(shù)擴(kuò)增期，擴(kuò)增曲線起峰，每個(gè)循環(huán)的產(chǎn)物量與初始模板量符合指數(shù)關(guān)系，PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系。

3、線性期：PCR反應(yīng)后期，由于PCR反應(yīng)體系各成分的消耗、產(chǎn)物抑制等因素的影響，反應(yīng)效率降低，產(chǎn)物量與初始模板量不再符合指數(shù)關(guān)系。

4、平臺(tái)期：PCR反應(yīng)停止，PCR產(chǎn)物不再隨循環(huán)數(shù)增加而增加。由于影響PCR擴(kuò)增的因素錯(cuò)綜復(fù)雜，每個(gè)反應(yīng)進(jìn)入平臺(tái)期的時(shí)間和平臺(tái)期的高低都各不相同。