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WB結(jié)果中無信號或顯示信號弱可能的原因及建議
日期：2025-04-29 15:58
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摘要：
WB結(jié)果中無信號或顯示信號弱可能的原因及建議：
①你所檢測的樣本中不表達目的蛋白，選擇表達量高的細胞作為陽性對照，用于確定檢測樣本是否為陰性，同時查閱文獻。
②檢測樣本低表達目的蛋白，提高上樣量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制劑。
③轉(zhuǎn)移不完全或過轉(zhuǎn)移，可以用麗春紅染膜并結(jié)合染膠(考馬斯亮藍)后確定條帶是否轉(zhuǎn)至膜上或轉(zhuǎn)移過頭；適當調(diào)整轉(zhuǎn)膜的時間和電流。
④抗體不能識別測試種屬的相關(guān)蛋白，購買抗體前應當認真閱讀抗體說明書，確定其是否能夠交叉識別測試種屬的對應蛋白。
⑤一抗孵育時間不足，建議4℃結(jié)合過...
WB結(jié)果中無信號或顯示信號弱可能的原因及建議：
①你所檢測的樣本中不表達目的蛋白，選擇表達量高的細胞作為陽性對照，用于確定檢測樣本是否為陰性，同時查閱文獻。
②檢測樣本低表達目的蛋白，提高上樣量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制劑。
③轉(zhuǎn)移不完全或過轉(zhuǎn)移，可以用麗春紅染膜并結(jié)合染膠(考馬斯亮藍)后確定條帶是否轉(zhuǎn)至膜上或轉(zhuǎn)移過頭；適當調(diào)整轉(zhuǎn)膜的時間和電流。
④抗體不能識別測試種屬的相關(guān)蛋白，購買抗體前應當認真閱讀抗體說明書，確定其是否能夠交叉識別測試種屬的對應蛋白。
⑤一抗孵育時間不足，建議4℃結(jié)合過夜。
⑥二抗與一抗不匹配，選擇針對一抗來源的種屬的抗體。
⑦洗膜過度，洗膜時間不宜過長，加入的去垢劑不宜過強或過多，建議使用0.1%的弱去垢劑Tween-20。