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PCR 實(shí)驗(yàn)室污染類型
PCR 實(shí)驗(yàn)室污染分類
1、樣本間交叉污染
主要是在采(取)樣的過(guò)程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過(guò)程中,由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。
2、PCR試劑污染
主要是在 PCR 組分試劑加樣過(guò)程中,由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染。
3、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染
這是 PCR 反應(yīng)中*主要*常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)?PCR 產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 PCR 檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的 PCR 產(chǎn)物污染,就可形成假陽(yáng)性。
還有一種容易被忽視的污染,是能造成PCR產(chǎn)物污染形式的氣溶膠污染,而氣溶膠造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。
4、克隆質(zhì)粒污染
在實(shí)驗(yàn)操作中會(huì)經(jīng)常用到陽(yáng)性參考品,這些參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成的,質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高,不小心使用極易造成污染。