二抗的種屬來源一般來說，不同的種屬來源與二抗的質(zhì)量沒有必然的聯(lián)系，來源于山羊的二抗與來源于驢的二抗在一般的實驗里沒有太多的差別。然而在一些特殊的實驗里，如雙標實驗里，如果其中一個一抗是山羊來源的，一個是小鼠來源的，則相應(yīng)的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗，此時二抗就不能選山羊或者小鼠來源的。選擇相應(yīng)的驢來源的二抗，就非常適合做類似雙標的免yi實驗。雙標得2個都抗才行，故選擇第3個種源的抗體。

1. 選擇哪種形式的二抗，是整個IgG分子，F(xiàn)ab片段，還是F(ab')2片段？整個IgG分子：此種抗體適用于多數(shù)情況。Fab片段：它們只有一個結(jié)合位點，一般用來封閉內(nèi)源性免yi球蛋白。F(ab')2片段：該種抗體是由兩個靠二硫鍵連接的用于結(jié)合抗原的Fab片段組成，這些抗體用在特定的情況中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細胞結(jié)合的情況。

2. 二抗的偶聯(lián)標記一般來講，偶聯(lián)到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC,  RRX, TR, PE）和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗。對于western blot和ELISA，常用的二抗是酶標二抗，而細胞或組織標記實驗（組織免yi化學(xué)，細胞免yi化學(xué)，流式細胞術(shù)）中通常使用熒光基團標記的二抗，免yi組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標記的二抗。

3. 抗體的純度親和層析純化的抗體一般更受歡迎，因為這些產(chǎn)品的純度更高，產(chǎn)生的非特異性背景也少。但是有些情況下也要考慮到純化過程中損失的IgG部分，因為其中含有親和力高的抗體，尤其是當(dāng)目的抗原存在的量較小的時候。